脱氧核糖核酸酶Ⅰ(9003-98-9)的性状:
本品既能消化单链又能消化双链DNA,产生带5'-磷酸的单核苷酸和寡核苷酸。DNase Ⅰ可独立地、随机地水解双链DNA中的任意一条链。类白色冻干粉,易溶于水,微溶于30%乙醇和丙酮最适pH值7.8。水溶液中加入5mmol/L Ca
2+或二异丙基氟磷酸(DFP)可增加其稳定性。抑制剂有EDTA和十二烷基磺酸钠;激活剂为二价金属离子,Mg
2+与Ca
2+合用可得到最佳效果。1%水溶液在280nm处吸收系数为11.1。限制消化的平均链长为四核苷酸,酶反应:脱氧核糖核酸═二核苷酸-5'-磷酸+寡聚核苷酸-5'-磷酸。
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脱氧核糖核酸酶Ⅰ(9003-98-9)的用途:
本品用于各个不同的方面,包括缺口翻译,DNase指纹分析图谱,重亚硫酸盐介导。用于生化研究,临床上常用作祛痰药,也可局部用于脓肿、血肿以及鞘内注射治疗脑膜炎。
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1.脱氧核糖核酸酶Ⅰ(9003-98-9)的制备:
以牛胰为原料,经稀硫酸抽提后由硫酸铵和乙醇分级沉淀得产品。
2.质量要求:
无RNase活性。活性≥10000u/mg蛋白。浓度为5~15mg蛋白/mL。
3.包装及贮运:
以消毒、白色尖底离心管密封包装,-20℃保存。通常对水是不危害的,若无政府许可,勿将材料排入周围环境。常温常压下稳定避免湿,热,高温。
4.概述:
最有代表性的核酸内切酶。最早是由M.Kunitz从胰脏中分离出结晶的,也称为胰脱氧核糖核酸酶或DNaseⅠ,EC3.1.21.1。分子量约3.1万,等电点pH4.7,最适PH7附近,需要Mg
2+和Mn
2+。分离单链和双链DNA,产生具有5'-磷酸末端的分解物。在一般条件下其分解产物含有1到8—12个寡聚核苷酸,平均大小等于四个核苷酸。反应初期似乎是先分解dpPupPy键,但因二价离子的存在对切断的方式有显著影响。因此酶容易得到结晶,所以于核酸的研究上广泛应用;又由于对整个结构已经明确,因而也是酶化学研究的材料。
其它: 1.急性化脓性蜂窝织炎、有支气管胸膜娄的活动性结核病人忌用。
2.禁与肝素、枸橼酸盐等配伍。
3.溶液需临用前配制,贮存温度不得超过4℃。
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