L脯氨酸可由明胶、干酪素之类蛋白质，用酸水解后经过离子交换树脂柱层析分离而得。现多以糖类为原料经发酵后分离而得。
发酵培养基经消毒后接入预培养的种子液，种量在10%左右，经（32±1）℃、48h发酵后，再加热至80℃，保温10min，冷却调酸度，离心除去沉淀。清液经732氢型柱吸附，再用水冲洗，然后用氨水洗脱解吸，洗脱液再通过717（OH型）柱吸附，用水冲洗后再用盐酸洗脱，洗脱液经薄膜浓缩、减压浓缩后，用酒精进行结晶，过滤，再经干燥可得L脯氨酸。
种子→发酵→酸化液→离子交换→水洗→氨水洗脱
→洗脱液→离子交换→水洗→盐酸洗脱→洗脱液→
薄膜浓缩→减压浓缩→酒精结晶→产品
可用作营养增补剂和风味剂。与糖共热可生成特殊的香味物质，按我国GB 2760—1996可用作香料。另外可用作氨基酸类药和用于生化研究。
棕色玻璃瓶密闭包装，外包装避光纸。阴凉、干燥处避光存放。
1、 摩尔折射率：27.90
2、 摩尔体积（cm3/mol）：96.9
3、 等张比容（90.2K）：249.0
4、 表面张力（dyne/cm）：43.4
5、 极化率：11.06
6、 介电常数：未确定
1、 疏水参数计算参考值（XlogP）：-2.5
2、 氢键供体数量：2
3、 氢键受体数量：3
4、 可旋转化学键数量：1
5、 互变异构体数量：
6、 拓扑分子极性表面积（TPSA）：49.3
7、 重原子数量：8
8、 表面电荷：0
9、 复杂度：103
10、同位素原子数量：0
11、确定原子立构中心数量：0
12、不确定原子立构中心数量：1
13、确定化学键立构中心数量：0
14、不确定化学键立构中心数量：0
15、共价键单元数量：1