热稳定性：42℃以下稳定
神经氨酸苷酶（neu－raminidase）是乙酰-神经氨酸水解酶（唾液酸酶）的俗称。该酶催化水解糖蛋白和寡糖的 α2-3、α2-6 和 α2-8 键连接的 N-乙酰神经氨酸残基。
神经氨酸苷酶的纯化方法，其特征在于包括以下操作步骤：
(1)超滤浓缩：景取产脲节杆崗的发酵液h淸1?20U进行膜超滤，用缓冲液A对超滤
后的浓缩液进行稀释至〇. 5?10L ;
⑵硫酸铵沉淀：缓慢加入226?516g硫酸钱，搅拌20?4()mindW 1?5h，5000?
15000g离心10?30min，去上清，沉淀用缓冲液B溶解到100?1000ml，搅拌充分后透析过
夜；
(3) DEAE琼脂糖凝胶FF柱层析：I)RAE琼脂糖凝胶FF柱用缓冲液B平衡后，将透析后样
品进行h样,缓冲液B平衡，缓冲液C洗脱，收集洗脱样品；
⑷苯基琼脂糖凝胶FF柱层析：往收粜的洗脱样品屮加入（NH 4 ) 2 S0 4 使终浓度达到
0. 6?().8M，然后苯基琼脂糖凝胶FF柱用缓冲液丨)平衡，将加入/ (NH 4 ) 2 S0 4 的洗脱样品进
行上样，缓冲液丨)平衡，缓冲液E洗涤，缓冲液F洗脱；
(5)将步骤（4)得到的洗脱样品进行超滤浓缩后用缓冲液B进行换液，然后冻干，
以卜.操作均在〇?5°C条件下进行；
以上缓冲液A、B、C、1)、E、F分别足：
缓冲液 A :丨0 ?iOOmM Tris-HCU i00 ?500mM NaU，pH6. 5 ?8. 5 ;
缓冲液 B : 10 ?lOOmM Tri s-HCl，pH6. 5 ?8. 5 ;
缓冲液 C :10 ?lOOmM Tris-丨 1C1，10 ?lOOOmM NaCl，pll6. 5 ?8. 5;
缓冲液 D :10 ?lOOmM Tris_HCl，()? 7 ?0. 9M(NH 4 ) 2 S0 4 , pH6. 5 ?8. 5;
缓冲液 F,:l()?lOOmM Tris-llCl，(). 4 ?()? 6M(M1 4 ) 2 S0 4 , 5 ?8. 5 ;
缓冲液 I: :i〇 ?iOOmM TrisHICUO. 2 ?0? 4M(ML j ) 2 S0 4 , pli6. 5 ?8. 5。
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