糜蛋白酶(9004-07-3)

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9004-07-3
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基本信息

  • 糜蛋白酶
  • 9004-07-3
  • α-糜蛋白酶;α-胰凝乳蛋白酶
  •  

  • 0
  • chymotrypsin
  • 232-671-2
  • 1.37[at 20℃]
  • alpha-chymotrypsin from bovine pancreas
  • 127°C

详细信息


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用途
糜蛋白酶
参数数值
化学性质 α-糜蛋白酶系自牛或猪胰中提取的一种蛋白分解酶,为白色或类白色结晶粉末。无气味,易溶于水,不溶于有机溶剂。等电点PI=8.1~ 8.6。水溶液中会迅速失活。10%的水溶液Ph值约为3,以Ph3~ 4的水溶液最稳定。干态稳定,在40C条件下,18个月无降低活力现象。
注射用糜蛋白酶为糜蛋白酶的无菌冻干品,为白色冻干块状物。水溶液不稳定,宜新鲜配制。
用途 α-糜蛋白酶可作为蛋白分解酶。一般用于手术后创口或创伤愈合、抗炎及防止局部积血、水肿、扭伤血肿、乳房手术后局肿胀、鼻炎、中耳炎等。用于白内障摘除、松解睫状肌韧带,以减少膜破裂和视网膜损伤。但是,用前须做过敏试验,不可静注,注射部位可间生疼痛和肿胀,肌注偶可引起过敏性休克,还可引起中度眼色素层炎,角膜水肿和暂时性青光眼。严重肝脏患者、凝血功能不正常、玻璃体不固定的创伤性白内障患者及不满20岁患者忌用。
白内障摘除术;配1/5000生理盐水溶液冲洗,由瞳孔注入后房,经2~3min,在晶体浮动后,以生理盐水冲洗,即可取出晶状体。肌注,每次5mg,每日1~2次,湿雾或喷雾:每日5mg,气溶疗法,每次0.2~0.3mg(加蒸馏水2~3ml),一日3~4次;气管滴入,配成每ml含本品0.5mg溶液,适量滴入。
用途 用于生化研究,蛋白质的结构分析、分解和消化,临床上用于创伤或手术后创口愈合、抗炎及防止局部水肿、积血、扭伤血肿、中耳炎、鼻炎等。
用途 该品为蛋白分解酶类药物。能促使血凝块、脓性分泌物和环死组织等的液化消除,用于眼科手术以松解睫状韧带、减少创伤性虹膜睫状体炎。亦可用于创口或局部炎症以减少局部分泌和水肿。
用途 用于外科各种手术后外伤的血肿、水肿、关节积血等
用途 一种丝氨酸蛋白酶,水解肽键的羧基端带有芳香或长疏水链(Tyr, Trp, Phe, Met)的肽键。备注:用于没有外源胰蛋白酶活性存在条件下的蛋白质水解。
生产方法 牛宰杀后1h内取出胰脏,用硫酸在0℃浸取。浸取液用硫酸铵分级盐析,盐析物溶于冷蒸馏水(用硫酸调节pH),再用硫酸铵和氢氧化钠调节pH,使结晶完全,反复溶解,再结晶,得到糜蛋白酶元结晶。将糜蛋白酶元结晶活化、盐析、透析、干燥,即得糜蛋白酶。
生产方法 以牛胰脏为原料,经提取、分级盐析后先制成胰凝乳蛋白酶原,经胰蛋白酶激活后,再用硫酸铵、乙醇重结晶精制而得。
生产方法 绞碎、提取牛宰杀后,迅速取出牛胰(一般在0.5 ~1h内),洗净,去掉脂肪、结缔组织等杂物,立即浸入预先冰冻好的硫酸溶液(0.125mol/L)中,骤然冷却,在0C左右保存,待积满100kg后投料。取胰投入绞肉机中绞碎成胰浆(必要时应绞3次),加入胰浆2倍量的冰冷硫酸(0.125mol/L)。置冷室中,每1 ~2h搅拌1次,浸渍提取24h。浸渍物用粗滤袋(或二层纱布)过滤,滤干后滤渣再用1倍量冷硫酸液(0.125mol/L重复上过程,再进行过滤,弃滤渣,合并2次滤液,每升滤液中加入固体硫酸铵使浓度为242g,此时硫酸铵浓度达到40%饱和度,冷室放置,过夜,虹吸上清液,底层沉淀加入适量硅藻土作助滤剂,减压过滤,上清液和滤液合并,得提取液。
牛胰冰冷H2SO4提取提取液
分级盐析、结晶每升提取液中加入固体硫酸铵205g,使硫酸铵浓度达到70%饱和度,冷室放置过夜,次日上层清液弃去,底层沉淀减压过滤至干,加入3倍于滤饼重的冰水使之溶解,重复用硫酸铵40%和70%饱和度分级沉淀,取第2次70%饱和度沉淀滤饼,加入1.5倍于滤饼重的冰水溶解,并加入0.5倍滤饼重量的饱和硫酸铵溶液,用氢氧化钠(5mol/L)调Ph5,于250C恒温箱中静置,保温48h进行结晶(取结晶液一滴置载玻片上用100倍显微镜观察,应有明显针状结晶),再将结晶减压抽滤至干,得糜蛋白酶原粗制品,按牛胰质量计算,收率5%~6%。取粗制胰蛋白酶原加入7倍量冰冷蒸馏水,使之溶解,并滴加硫酸(2.5mol/L)调节Ph达到2左右,溶液置布氏漏斗上用酸洗滑石粉过滤,滤液应澄清,再加入2倍量饱和硫酸铵溶液,滴加氢氧化钠(5mol/L)中和酸度使Ph为5左右,在20~250C条件下,保温静置4h以上,即有白色沉淀析出,显微镜下观察为棒状结晶,过滤弃滤液,沉淀再按此法重复结晶3次,得糜蛋白酶原结晶。
提取液(NH4)2SO4分级盐析沉淀(NH4)2SO4;NaOH;Ph4^→结晶糜蛋白酶原
活化、盐析、结晶称取糜蛋白酶原结晶,加入3倍于该量的冰冷蒸馏水并滴加硫酸溶液,使之溶解,然后加入等量的Ph7.6磷酸盐缓冲溶液(0.5mol/L)和一定量的氢氧化钠[与(2)中2.5mol/L硫酸的物质量相当],使Ph保持在7.6,再在每100g的糜蛋白酶原中加入150倍以上的胰蛋白酶5mg。置于50C的冰箱中,使之活化48h。用硫酸(0.5mol/L)调节Ph达到4左右,在每升的活化液中加入固体硫酸铵0.5kg,盐析并放置2h,溶液置布氏漏斗减压过滤,弃去滤液,沉淀物用3/4倍量的硫酸(0.005mol/L),酸洗滑石粉澄清,加入少量晶种,于20~250C静置24h,当大量的结晶生成时,过滤,即得糜蛋白酶结晶。
糜蛋白酶原冰冷;胰蛋白酶;50活化活化
H2SO4;Ph4盐析;结晶糜蛋白酶结晶
透析、灭菌、干燥称取糜蛋白酶结晶,加入3倍于该量的蒸馏水,并滴加硫酸溶液(0.005mol/L),使之溶解,每350ml装入一个透析袋中,使透析袋浸于50的水浴中,并使内外溶液处于同一平面上,用水连续透析2~ 3d,透析应完全。
糜蛋白酶结晶50透析 透析液冷冻;减压灭菌;干燥成品
别名胰凝乳蛋白酶;A-糜蛋白酶;A-胰凝乳蛋白酶;Α-糜蛋白酶(+4℃);凝胰朊酶;胰凝乳蛋白酶(牛);Α-糜蛋白酶(牛胰腺);Α-胰凝乳蛋白酶,来源于牛胰腺,1000单位/毫克
英文别名alfapsin;alphachymar;alpha-chymarophth;alpha-chymotrypsinfrombovinepancreas;avazyme;catarase;chymar;chymolase
性状
糜蛋白酶
参数数值
熔点 127°C
储存条件 2-8°C
溶解度 Reconstitute in 1mM HCl. Soluble at 10mg/ml in 1mM HCl. 2mM calcium chloride serves as a stabilizer. Store aliquoted solutions at -20°C fup to a week.
形态salt-free, lyophilized powder
颜色white
Merck 13,2282
EPA化学物质信息Chymotrypsin(9004-07-3)
安全说明
糜蛋白酶
参数数值
危险品标志 Xn,B
危险类别码 36/37/38-42/43-42
安全说明 26-36-36/37-24-22
WGK Germany 3
RTECS号GC3050000
3-10
TSCA Yes
海关编码 35079090
毒害物质数据9004-07-3(Hazardous Substances Data)

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