小鼠总蛋白C(TPC)ELISA试剂盒

CAS NO:
纯 度:
98
规 格:
48t/96th
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详细信息

小鼠总蛋白C(TPC)ELISA试剂盒原理:

可催化血红蛋白水解,水解产物与福林试剂反应后显蓝色;一定范围内,其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。自备仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。试剂组成和配制:试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体×1 瓶,4℃保存。试剂三:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入10mL试剂二充分溶解。试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入10mL蒸馏水充分溶解。试剂五:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入15mL蒸馏水充分溶解。试剂六:液体×1 瓶,4℃保存。标准品:液体×1 支,0.5μmol/mL 酪氨酸标准溶液浓度4℃保存。粗酶液提取:组织样品:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即粗酶液。测定步骤:1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到580nm,蒸馏水调零。2. 试剂三和试剂四置于37℃水浴预热30min。3. 标准管:取0.5 mL EP管,加入20μL标准品,40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六, 混匀后室温静置20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96 孔板,580 nm 测光吸收,记为A 标准管。4. 空白管:取0.5 mL EP管,加入20μL蒸馏水,40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六, 混匀后室温静置20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96 孔板,580nm测光吸收,记为A标准空白管。5. 对照管:取0.5mL EP管,加入100μL试剂三,置于37℃水浴保温10min;加入100μL试剂四, 盖紧后摇匀1min;加入20μL粗酶液,混匀后 8000g 4℃离心10分钟;取上清液20μL,加入新 EP管,再加入40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六,混匀后室温静置20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,580nm测光吸收,记为A空白管。6. 测定管:取0.5mL EP管,加入20μL粗酶液,100μL试剂三,置于37℃水浴保温10min;加入100μL试剂四,盖紧后摇匀1min;8000g 4℃离心10分钟;取上清液20μL,加入新EP管,再加入40μL试剂二,120μL试剂五,20μL试剂六,混匀后室温静置20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,580nm测光吸收,记为A测定管。 注意:空白管和标准管只需要测定一次。

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上海谷研实业有限公司

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